基于纳米颗粒的基因编辑酶传递

以Cas9为基础的疗法有可能彻底改变遗传疾病的治疗。然而，在CRISPR疗法的治疗潜力得以实现之前，需要开发安全有效的Cas9蛋白、gRNA和供体DNA递送方法。在本演示中，我将描述一种称为CRISPR-Gold的非病毒Cas9载体，它可以通过直接递送Cas9蛋白、gRNA和供体DNA在体内诱导同源性定向DNA修复（HDR）。CRISPR Gold由组装有Cas9/gRNA核糖核蛋白（RNP）复合物、供体DNA和内体破坏性聚合物的金纳米粒子组成。我们已经证明CRISPR Gold可以通过HDR纠正mdx小鼠中导致Duchenne肌营养不良症（DMD）的DNA突变，肌肉注射后的效率为5.4%，且与目标DNA损伤的程度最小。此外，CRISPR Gold能够在颅内注射后将Cas9 RNP送入大脑，并通过非同源末端连接（NHEJ）删除mGluR5基因，将小鼠从FMR1相关孤独症中解救出来。CRISPR Gold是一种非病毒载体，可在体内产生HDR和NHEJ，具有治疗肌肉和神经系统疾病的潜力。

学习目标：

1.讨论通过Cas9核糖核蛋白的传递进行体内基因编辑。
2.讨论将聚合物与蛋白质缀合的新策略。